텔로미어 안정성 평가를 위한 단일세포 유세포 분석 기반 qPCR 프로토콜 최적화

본 문서는 다양한 세포군 내에서 발생하는 텔로미어 길이에 대한 이질성(Heterogeneity)을 정량적으로 측정하기 위해 Single-Cell Flow Cytometry와 Quantitative PCR (qPCR)을 융합하여 적용하는 실험적 방법론을 다룹니다.

측정 전략

• Telomere Restriction Fragment (TRF) 분석의 한계 극복: 전통적인 TRF 분석은 세포 집단 평균값 제공에 치중하므로, 이를 극복하고자 합니다.
• Fluorescence-based Single-Cell Assay: 특이적인 텔로미어 프로브를 이용하여 각 세포 수준에서 텔로미어 길이를 형광 강도로 검출하는 방법을 사용하며, 이는 단일세포 분석 기술의 확장입니다.
• PCR Amplification 및 Quantification: 추출된 텔로미어 DNA를 대상으로 특정 프라이머 쌍을 사용하여 증폭시키고, 이를 통해 상대적 텔로미어 길이를 생물정보학적 방법으로 정량화합니다.